Ugrás a tartalomhoz Lépj a menübe
 


2011-2012 (7)

2012.04.18

MIKROSZAPORÍTÓ LABORATÓRIUM 

Tenyésztő-, fény-, nevelőszoba

-          Megvilágítás hossza automatikusan szabályozott (vészkikapcsoló, klíma meghibásodása esetén)

-          hőmérséklet: 17-27 °C (faiskolai anyag alacsonyabb hőmérséklet igény); nem ingadozhat, 30 °C fölé nem mehet

-          hőmérséklet kiegyenlítettség fontos – levegő mozgatásával (hőcserélő panel a mennyezeten)

-          Hideg-meleg levegő vertikálisan áramlik – polcok egy részének hőmérséklete nem egyenletes

-          elkerülhető: - rácsos polcok vagy vízszintes levegőáramoltatás

-          falfelületek, padló, polcok könnyen tisztíthatók

-          pormentesség: - rendszeres, alapos takarítás – légtechnikai előírások betartása

Vegyszertároló

-          Anyagok többsége szobahőmérsékleten

-          kivétel: hormonok, antibiotikumok egy része (címkén jelzett hőmérsékleten, hűtve)

-          tűzé, robbanásveszélyes vegyszerek: Rb – szekrény

-          mérgek: külön, zárható – méreg szekrény

-          polcokon jól hozzáférhetőek legyenek, biztonsági adatlap + lista vezetése

Szaporítást meghatározó fizikai körülmények

Tényezők:

1.      Fény

2.      Hőmérséklet

3.      Kultúra hosszúsága, időtartama

4.      Páratartalom

I.                   FÉNY – fotoperiódus

-          sötét és világos időszakok váltakozása

-          hagyományosan növény származása határozza meg (rövid – hosszú nappalon) virágzik – mikroszaporításban nem ez a cél!

-          12/12, gyakoribb a 16/8

-          kivétel: - kalluszsejtek szaporításához nem kell fény

-          orchidea magokat csírázás után tesszük fényre

-          egyes növények szaporítása egy darabig sötétben (Ananas, Spathiphyllum)

Hullámhossz

-          különböző hullámhosszú fények – színek

-          nap összetett fehér fényét szétválaszthatjuk (üvegprizma)

Az így szétválasztott színek = spektrum

-          Legfontosabb: vörös fény (650-680nm) – nélkölözhetetlen a növények számára (klorofill hasznosítja), segíti a citokinin képződését, auxinok mennyiségét csökkenti

-          narancs (585-650 nm)

-          sárga (575-650 nm)

-          zöld (490-575 nm)

-          kék (420-490 nm): flavin, karotinoidok hasznosítják; kalluszkultúrák fejlődésére hat

-          ibolya (380-420 nm)

-          növény a 360 nm-es fényt még hasznosítja

-          ultraviola (UV) vagy ultraibolya (200-400 nm): növény nem képes hasznosítani, de megnyúlást serkent.

-          fontos! – olyan fénycsövek, melyek a fotoszintézis tartományában sugároznak (660-460 nm): nagyobb részt meleg – fehér (warm – white) + kisebb rész kékes színű (cool – white); legideálisabb fotoszintézis fénycső (lila színű)

Megvilágítás erőssége

-          = fényintenzitás: egységnyi területre jutó fény mennyisége

-          mértékegysége: lux

-          Pl: telihold = 1 lux

déli napsütés nyáron = 100.000 lux

-          mikroszaporításban: 2000-5000 lux

(ennél több: - pazarló, kultúra károsodhat, növény levelei bordók, gyökérképződést gátolja)

-          10 éve – fotoszintetikus foton – flux (PPF):

Egységnyi idő alatt, egységnyi felületre jutó fotonok mennyisége

Mértékegysége: mól/m2-s

II.                HŐMÉRSÉKLET

-          Hőigényt származás határozza meg

-          hőmérséklet mérés: lezárt tenyésztőedényben lévő hőmérő

-          vízfürdő (költséges)

-          magas hőmérsékleten csökken a citokinin aktivitása – vírusmentesítés (hőterápia)

-          hőmérséklet: 17-27 °C

-          kivétel: trópusi eredetű növények: 32-35 °C

mérsékelt égövi növények: 20 °C alatt

III.             KULTÚRA HOSSZÚRA HOSSZÚSÁGA IDŐTARTAMA

    1. Kultúra hosszúsága: passzálások között eltelt idő

Függ:- fajtól

-          fajtától

-          táptalajtól (sokszorozón tovább maradhat, mint gyökereztetőn)

-          hőmérséklettől

-          mennyi növény van a tenyésztőedényben

-          4-6 hét

-          vannak gyors növekedésű növények (banán)

-          lassú növekedésű (bromélia félék)

-          átrakás nem időben történik:

o   gyökereztető fázis hosszabb – csökken az akklimatizálás eredése

o   fás szárúaknál (3 hét) – ha késik, lombhullás következhet be

-          alacsony hőmérséklet + nagy cukor tartalom – átrakás hosszabbodhat 3-4 hónapra!

    1. Kultúra időtartama: steril kultúrába kerüléstől mennyi idő telt el.

-          egy kultúra bármeddig fenntartható, átrakásra kell figyelni (citokinin mennyiségét csökkenteni kell)!

-          pl: 70 éves paradicsom kultúra

IV.              PÁRATARTALOM, GÁZOK

  1. páratartalom:

-          Elérheti a 100%-ot is

-          hőmérséklet ingadozik – pára csapódik le – ez a pára visszacsöpög, kultúra vizenyősödése

-          Vitrifikáció: sejtfal elvékonyodik – több vizet vesznek fel a sejtek – sejtközötti járat vízzel telítődik – nem visszafordítható 

IV.GÁZOK

  1. Etilén: termés érést, nyugalmi fázist szabályozó légnemű hormon

-          felhalmozódása problémát okoz

-          kívülről kerülhet be:

o   sterilizáláshoz használt alkohol, Bunsen-égő tökéletlen égéstermékeiből

-          belülről (endogén etilén):

o   stressz hatására (új táptalajra helyezés, sebzés – növény barnul, keletkezett etilén tovább öregít)

-          táptalaj is etilénképződést okozhat (2,4-D)

-          Megoldás:

o   ezüstnitrát (AgNO3) 1-50 mg/l

o   tenyészedény megfelelő szellőzöttsége

o   tenyészedény alakja (etilén könnyebb a levegőnél – magasabb régióban)

  1. Szén-dioxid

-          fotoszintézishez szükséges (csökken a CO2 – csökken a fotoszintézis; nő a CO2 – kezdetben nő, majd nem változik)

-          0,1 térfogat % felett mérgező

-          Mikroszaporítás hátránya magas költségek

-          cél: költségek csökkentése

-          megoldás: automatizálás

-          Pl. folyékony táptalaj alkalmazása – bioreaktorok – új edények, új berendezések

-          Egyszer használatos műanyag tenyészedények (plant – boksz)

-          táptalaj adagolás steril (nagy teljesítményű táptalajfőző+töltő-adagoló gép = CLONMATIC; Hollandia, Kertész TSZ)

-          Célrobot: Steril manipulálás anyag-, és élő munkaigényes, ennek csökkentésére

-          mosogató-, tisztító automaták

-          Időleges elárasztás (tenyészetek nem állandóan vagy nem teljes felületükkel merülnek)

-          kezdetben csak forgatták a tenyészeteket

-          később steril levegő bevezetése – életképesség javult!

-          Előnyei:

o   Nagy tömegű növényanyag kis felületen való elhelyezése

o   csökken a kézimunka idő

o   növény folyamatosan érintkezik a tűpanyagokkal – fejlődés felgyorsul

o   folyamatos oxigén ellátás kedvező, fotoszintézisre, szöveti felépítésre – könnyebb akklimatizálás

-          Fito-Bioreaktor Munkacsoport – Fári Miklós (növényi mikroszaporítás, sejt- és szövettenyésztés legújabb eszközeinek fejlesztése)

-          Escalona és mtsai (1999): három különféle tenyésztési módszer

o   szilárd táptalaj

o   folyadék kultúra

o   időleges elárasztás

o   (legnagyobb szaporítási fok)

  1. Kultúra részletes bemártása:

-          gáz fázisú: kultúrákat időnként megpermetezik tápoldattal vagy tápanyagködben tartják

-          folyadék réteges: növény alapi része van tápoldatban

-          időnként bemártó biorektor: kultúrákat előre beállított időtartamú periódusonként mártják a tápoldatba. (két edény: tápoldat – explantátum; pumpás rendszer, elárasztási idő leteltével a nyomás megszűnik, tápoldat visszaáramlik) pl: RITA, BIT

  1. Kultúra folyamatosan van elárasztva:

-          mechanikusan mozgatott (turbinákkal, propellerekkel)

-          levegővel mozgatott (legegyszerűbb; steril levegőt vezetnek be az edény aljára) – egyszerű levegőzésű vagy buborékoszlopos bioreaktorok

-          Előnye: működtetése költségkímélő

SZÖVETTENYÉSZTÉS MUNKAMŰVELETEI:

            Merisztématenyésztés

-          Kiindulási anyag: növény vírusmentes része (hajtás vagy gyökércsúcs)

-          előkezelés – anyanövény hőkezelése

-          táptalaj: citokinin, auxin és vitaminok

-          eredmény: egyetlen utód (ezt szaporítják tovább)

Mikroszaporítás

-          kiindulási anyag: mertisztéma tenyésztés egyetlen utódja, rügykezdemény

-          táptalaj: citokinin (serkentő hormon)

-          Rügyek fejlődésnek indulnak – organogenezis (egyes szervek kifejlődése)

-          eredmény: néhány utód

-          hibrid, kiméra (mozaik növények) növények is szaporíthatók így.

Szövettenyésztés

-          kiindulási anyag: merisztéma

-          táptalaj: 2,4-D (auxin) vagy citokinin-auxin egyensúlyos

-          kallusz képződik (speciális feladatra nem módosult sejtek; totipotensek – mindenből kész növény regenerálható citokinin tartalmú táptalajon)

-          sejtek fejlődése kétféle:

o   organogenetikus: egy pólusú regeneráció; rügyek, vagy csak gyökerek

o   embriogenetikus: kétpólusú; rügy és gyökér is

-          kallusz folyamatosan szaporítható (időnként szét kell szedni, sejtszuszpenzió)

-          sötétben

-          eredménye: sok utód

-          Genetikailag szórt utódok (hibrid, kiméra)

Androgenezis

-          Kiindulási anyag: hímivarsejt vagy pollen (F1-es hibrid)

-          csak egyik szülő (nincs genetikai változatosság)

-          Utód: ’n’

-          Kolhicin (kromoszómakészlet megduplázása) – húzófonalak tevékenységét gátolja; nem vándorolnak el a kromoszómák; nem tud osztódni a sejt)

-          ezek a sejtek: ’2n’

-          így regenerált növények: dihaploid (DH) növények

-          1 év alatt olyan hibrid, mint amit 10-15 év beltenyésztés és szelekciós munka eredményezne

LABORATÓRIUMI NÖVÉNYSZAPORÍTÁS SZEREPE

-          Mikroszaporítás: azonos fajok vagy fajták vegetatív, fajtaazonos szaporítása in vitro és kontrolált körülmények között.

-          Cél: minél több növény, minél rövidebb idő alatt, évszaktól függetlenül

-          Murashige (1974) – 3 szakasz:

1.      Steril kultúra létrehozása;

2.      tenyészet felszaporítása;

3.      növények előkészítése a talajba ültetéshez, gyökeresítés

-          Debergh és Maene (1981):

o   beiktattak egy 0. vagy előkészítő szakaszt

o   A 3. szakaszt két részre osztotta: elongációs (in vitro), gyökeresítési szakasz (ex vitro)

o   végeredmény: 5 szakasz

0.      Előkészítő szakasz

1.      Steril kultúra létrehozása

2.      tenyészet felszaporítása

3.      elongációs szakasz

4.      gyökeresítési szakasz

  1. Előkészítő vagy 0. szakasz

-          Célja:

o   sterilizálás megkönnyítése (indítás előtt 2-4 héttel lelevelezés)

o   anyanövény élettani állapotának

megváltoztatása:

§  fény alkalmazása: vörös fényen előkezelt petúnia anyanövény leveléről indított kultúra 3*os hajtás mennyiség a kontrollhoz képest.

§  Hőmérséklet: hatása főleg a hagymás növényeknél (hőkezelés, hidegkezelés {4-5 °C, 30-100 nap} – megszünteti az aktív nyugalmi periódust)

§  Növekedésszabályozó anyagok: elősegítik az anyanövény rejuvenilizációját – pl: citokininek – fás növényeknél idősebb fajta visszaoltása hosszadalmas – explantátum kezelése (levél vagy rügy) citokinines oldattal szívatjuk fel.

  1. Indító szakasz

-          Célja: steril kultúra létrehozása

-          táptalaj: kis mennyiségű citokinint tartalmaz

-          indítás sikerességét befolyásolja: felszíni sterilizálás

-          fontos explantátumként szolgáló növényi rész kiválasztása:

o   merisztémát tartalmazzon

Pl: rügyek (leggyakoribb)

hajtáscsúcsok

levél-, levéldarab (Begonia, Kalanchoe)

Virágbimbó (gerbera, spathiphyllum)

Hagyma vagy gumó (hagymás, gumós növények)

-          méret (túl kicsi – csekély túlélés)

-          Fenolosodás (táptalaj barnulás illetve feketedés)

Sebzés – fenolszármazékok képződése (roncsolt sejtekből) – explantátum pusztulása

Védekezés: aszkorbinsavas áztatás

o   aktív szén

o   alacsony pH, sötét illetve alacsonyabb hőmérséklet

o   citokinin mellőzése

o   folyékony táptalaj

  1. Szaporító (sokszorozó) szakasz

-          célja: tenyészet felszaporítása

-          táptalaj: citokinin túlsúlyos (organogenezishez citokinin – auxin megfelelő aránya; néha nem kell auxin)

-          egy része visszakerül a szaporításba, másik része elongációs vagy gyökeresítő táptalajra

-          Szaporodási ráta: egy szubkultúra alatt fejlődő új hajtások száma

Függ:        - fajtól

                  -fajtától                                                                      1

                  -táptalaj összetevőktől

                  -tenyésztés körülményeitől 

    1. Járulékos rügyindukció

Explantátum – sok új merisztéma, majd rügy differenciálódik – növénycsokrocskák

pl.: páfrány, filodendron

Speciális eset: levél – járuékos hajtások

pl.: Begonia, Kalanchoe, Saintpaulia

Fás növényeknél nehéz.

    1. Hónaljrügy – indukció vagy nódusz kultúra

Rügy vagy hajtáscsúcs – új növényeket feldaraboljuk – leveles vagy 1-2 rügyes hajtásrészt újra táptalajra helyezzük – levélhónaljból újra hajtás – neveljük – feldaraboljuk…

Pl.: Ailanthus altissima, Bíborsárkány

Előnye: genetikai stabilitás biztosabb

Hátránya: szaporodási ráta alacsonyabb, mint a járulékos rügyindukciónál

    1. Szomatikus embriókultúra

Kallusz indukálása – sejtszuszpenzió (folyékony táptalajon) – sejtekből embriók (táptalaj megváltoztatása) – embriók továbbnevelése – akklimatizálás

Hátránya:

o   körülményes

o   genetikai stabilitás elvész

Ritka, ott alkalmazzák, ahol a többi nem alkalmazható. Pl.: tűlevelű fenyők

-          Rejuvenilizáció (visszafiatalodás)

o   Fás növényeknél (termőre fordult növényről szedett explantátum – mikroszaporítás során nehézségek:

§  alacsony szaporodási ráta

§  gyenge gyökeresedés

§  gyökeresedés hiánya

o   megoldás: citokinin alkalmazása

-          Rendellenességek a felszaporítás során

Felszaporítás kulcskérdése: megfelelő citokinin és annak mennyisége

o   Től nagy adag – genetikai, morfológiai változások

Pl: gerbera – bokrosodás (sok levél, kevés virág)

Szamóca (BA-t használva) – gyökér alig fejlődött, sor virág, termés deformálódott 

  1. Elongációs és gyökeresítő szakasz

-          Elongációs (hajtásmegynyújtás)

Módja:

o   Csokros passzálás

o   Növényeket nem passzálják, folyékony elongációs táptalaj kerül a szaporító táptalajra. – felesleges hormonokat leköti – növény megnyőlása (ehhez hűtéssel ellátott növénypolcok, vitrifikáció ellen)

Második gazdaságosabb

-          Gyökeresítés

o   Befolyásoló tényezők:

§  Auxin mennyisége (van ami igényel, van ami nem)

§  Túlzott citokinin gyökeresedést gátolhatja (Kinetinnél nem tapasztaltuk

-          Módjai:

o   in vitro

o   ex vitro

§   előnyei:

·         Költség csökken

·         jobb a gyökerek felépítése

§  in vitro nyert hajtások, mint minidugványok: auxinos oldatba mártás vagy a közeget auxinos oldattal itatják át.

  1. Akklimatizációs szakasz

-          in vitro előállított gyökeres vagy gyökér nélküli növénykék üvegházi körülmnényekhez való szoktatása.

-          in vitro fejlődött növények felépítése:

o   kutikula vékonyabb, sokszor hiányzik

o   sztómák nem elégg finkcióképesek

o   oszlopos parenchima sejtek kisebbek, egy réteg

o   szivacsos parenchima tömöttebb

o   levelek vékonyabbak

o   kevés klorofilltartalom (mixotróf)

-          Speciális üvegház:

o   párafüggöny berendezés (ha nincs fóliaalagút – fátyolfólia): magas páratartalom szükséges

o   árnyékoló berendezés: alacsony fényintenzitás

-          Közeg:

o   laza

o   jó vízáteresztő

o   megfelelő pH + tápanyagtartalom

o   steril (tálcák, fóliák is)

o   tőzeg-perlit keverék

o   növény védőszerrel kezelt

-          Hőmérséklet:

o   15-30 °C

o   kiindulási = tenyésztés hőmérséklete

o   fokozatosan csökkenteni (árnyékolás csökken – alacsonyabb hőmérsékleten is tarthatók)

o   talpfűtés (gyökérfejlődés megindulásáig – új levelek fejlődése jelzi)

o   Szabadföldi növények esetén: - üvegház után magasárnyékoló alá helyezés – majd szoktatás a teljes napfényhez

o   fás növényeknél gyökeresítés + akklimatizáció tavasszal vagy nyár elején (áttelelésre képes legyen)

o   akklimatizált növények szállítása: kartondobozba és fóliába csomagolva (1 hetet is kibírnak)

 

 

Hozzászólások

Hozzászólás megtekintése

Hozzászólások megtekintése

Natural Ways to Farther down Blood Distress

(ANellFageMed, 2018.08.05 03:48)

Poids est comment robuste votre sang pousse contre les parois de vos arteres lorsque votre coeur determination pompe le sang. Arteres sont les tubes qui transportent prendre offre sang loin de votre coeur. Chaque age votre manque de sensibilite bat, il pompe le sang tout au long vos arteres a la prendre facilement de votre corps.
https://www.cialispascherfr24.com/acheter-cialis-generique-en-ligne/

How To Prevent Prostate Problems And Diseases?

(AlbertDot, 2018.06.12 07:25)

The prostate gland is central to the section of a male's the reproductive system. It secretes fluids that aid in the transportation and activation of sperm. The prostate related is found just as you're watching rectum, below the bladder and surrounding the urethra. When there is prostate problem, in most cases very uncomfortable and inconvenient for the patient as his urinary method is directly affected.

The common prostate medical problems are prostate infection, enlarged prostate and prostate cancer.



Prostate infection, often known as prostatitis, is regarded as the common prostate-related symptom in men younger than 55 yrs . old. Infections of the prostate are classified into four types - acute bacterial prostatitis, chronic bacterial prostatitis, chronic abacterial prostatitis and prosttodynia.

Acute bacterial prostatitis will be the least common coming from all kinds of prostate infection. It is a result of bacteria found in the large intestines or urinary tract. Patients can experience fever, chills, body aches, back pains and urination problems. This condition is treated through the use of antibiotics or non-steroid anti-inflammatory drugs (NSAIDs) to alleviate the swelling.

Chronic bacterial prostatitis is really a condition connected with a particular defect within the gland along with the persistence presence of bacteria inside urinary tract. It can be due to trauma towards the urinary tract or by infections originating from other regions with the body. A patient can experience testicular pain, small of the back pains and urination problems. Although it is uncommon, it could be treated by removal in the prostate defect followed by the use antibiotics and NSAIDs to take care of the soreness.

Non-bacterial prostatitis is the reason for approximately 90% of most prostatitis cases; however, researchers have not even to determine what causes these conditions. Some researchers believe chronic non-bacterial prostatitis occur as a result of unknown infectious agents while other believe intensive exercise and lifting can cause these infections.

Maintaining a Healthy Prostate

To prevent prostate diseases, an effective diet is important. These are some from the actions to maintain your prostate healthy.

1. Drink sufficient water. Proper hydration is essential for health and wellness and it will also keep your urinary track clean.

2. Some studies advise that a couple of ejaculations weekly will prevent cancer of prostate.

3. Eat steak moderately. It has been shown that consuming more than four meals of beef every week will raise the risk of prostate diseases and cancer.

4. Maintain a suitable diet with cereals, vegetable and fruits to be sure sufficient intake of nutrients necessary for prostate health.

The most crucial measure to consider to make certain a proper prostate is always to opt for regular prostate health screening. If you are forty years and above, you should select prostate examination at least a year.